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Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209

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• 更新時(shí)間：2023-05-02
• 廠(chǎng)家性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

高特異性擴增，所需優(yōu)化次數少
?所需優(yōu)化次數少
?PCR特異性高
?操作方便，可在室溫下構建反應體系
Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209

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Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209

高特異性擴增，所需優(yōu)化次數少

• 所需優(yōu)化次數少

• PCR特異性高

• 操作方便，可在室溫下構建反應體系

不同于抗體介導的方法，HotStarTaq DNA Polymerase應用化學(xué)介導的熱啟動(dòng)，可確保聚合酶在PCR初始加熱階段*沒(méi)有活性。HotStarTaq DNA Polymerase提供*的QIAGEN PCR Buffer，將非特異性擴增產(chǎn)物、引物二聚體和其他污染降至**。一種新型的添加劑Q-Solution，可實(shí)現難擴增的模板（如GC含量高的模板）高效擴增。

Performance

每一批HotStarTaq DNA Polymerase都經(jīng)過(guò)*的質(zhì)量控制測試，包括：嚴格的PCR特異性和具有可重復性的試劑，即使低拷貝的靶分子也可擴增。通過(guò)檢測，HotStarTaq DNA Polymerase可確保高度特異性和在熱啟動(dòng)PCR中的表現（參見(jiàn)"Higher specificity with different primer–template systems"、"Superior performance"和表格）。該試劑盒提供的新型PCR緩沖液使得在多種PCR條件下都維持高特異性，無(wú)需優(yōu)化（參見(jiàn)"Tolerance to variable magnesium concentration"）。試劑盒中的Q-Solution可進(jìn)一步優(yōu)化PCR（參見(jiàn)"Amplification of difficult templates"）?？傊?，這些組合確保了在多種應用中的特異性擴增（參見(jiàn)"Effect of hot start on RT-PCR performance"和"Highly sensitive single-cell PCR"）。

Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209

HotStarTaq DNA Polymerase特性

濃度：5 units/µl
重組酶：是
底物類(lèi)似物：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速度：72°C條件下2–4 kb/min
酶半衰期：97°C條件下10 min，94°C條件下60 min
擴增效率：≥10⁵倍
5'–>3'外切酶活性：是
額外添加A：是
3'–>5' 外切酶活性：否
核酸酶污染：否
蛋白酶污染：否
RNases污染：否
自啟活性：否

Qiagen203203/203205/203207/203209

Principle

HotStarTaq DNA Polymerase，一種經(jīng)修飾的Taq DNA Polymerase，確保熱啟動(dòng)PCR的高度特異性。該試劑盒包括新型的雙陽(yáng)離子PCR緩沖液、Q-Solution和MgCl₂。

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供，常溫下沒(méi)有聚合酶活性。避免PCR構建和循環(huán)初始階段低溫條件下非特異性引物的延伸和引物二聚體的形成（參見(jiàn)"Superior performance in hot-start PCR"和"Higher specificity with different primer–template systems"）。95°C條件下孵育15分鐘即可激活HotStarTaq DNA Polymerase，這個(gè)步驟可整合入已有的熱循環(huán)程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通過(guò)提高每個(gè)PCR擴增退火過(guò)程特異性引物的結合比例，確保PCR每個(gè)循環(huán)特異性擴增（參見(jiàn)"Increased specificity of primer annealing"）。*的KCl和(NH₄)₂SO₄平衡組合，使得該緩沖液與傳統的PCR緩沖液相比在很寬的溫度和Mg²⁺濃度范圍內都有嚴格的引物退火條件和高度的特異性，無(wú)需進(jìn)行耗時(shí)的優(yōu)化（參見(jiàn)"Tolerance to variable magnesium concentration"）。

Q-Solution

該產(chǎn)品同時(shí)提供Q-Solution，一種新型的PCR添加劑，通過(guò)更改DNA熔解行為促進(jìn)難擴增模板的擴增。這種*的試劑可進(jìn)一步優(yōu)化由模板引起的表現不理想的PCR，如過(guò)多的二級結構和富含GC的模板（參見(jiàn)"Amplification of difficult templates"）。不同于DMSO和其他PCR添加劑，Q-Solution的濃度是確定的，沒(méi)有*性，并且保證PCR的純度。而且PCR中加入Q-Solution不會(huì )影響PCR的準確性。

Procedure

HotStarTaq DNA Polymerase提供高效、經(jīng)優(yōu)化的實(shí)驗方案，用于快速、方便的構建PCR反應體系。95°C條件下孵育15分鐘激活HotStarTaq DNA Polymerase，可以整合入已有的熱循環(huán)程序。反應可在室溫下建立，更加方便和易于使用（參見(jiàn)"HotStarTaq procedure"）。

Applications

HotStarTaq DNA Polymerase適合多種應用，包括各種富有挑戰性的研究，如各種擴增應用：

• 復雜的基因模板

• 復雜的cDNA模板（如RT-PCR）

• 低拷貝的靶序列（如單細胞PCR）

• 多重引物對反應

  
  

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